犬IL-10檢測試劑盒（ELISA）
犬IL-10檢測試劑盒產品詳細 | 中文名稱 | 犬IL-10檢測試劑盒（ELISA法） | | 英文名稱 | RayBio® Canine IL-10 ELISA Kit | | 產品貨號 | ELH-IL-10 | | 產品規格 | 96T | | 檢測樣本 | 血清、血漿、細胞培養上清液 | | 適應物種 | 犬 | | 預期用途 | 定量測定犬血清、血漿和細胞培養上清液中的IL-10的含量 | | 產品品牌 | 美國RayBio | | 供應商家 | 深圳市科潤達生物工程有限公司 |
犬IL-10試劑盒預期用途 RayBio®犬IL-10試劑盒采用體外酶聯免疫吸附測定法，定量測定犬血清（犬IL-10濃度在正常血清/血漿中較低，并且在該測定中可能檢測不到）血漿和細胞培養上清液中的IL-10的含量。
犬IL-10檢測試劑盒檢測原理 犬IL-10檢測試劑盒使用包被有犬IL-10特異性抗體的96孔酶標板，標準品和樣品被加入到孔中，樣品中存在的IL-10通過固相的抗體與孔結合。洗滌后加入生物素化的抗犬IL-10抗體。 洗去未結合的生物素化抗體后，將HRP-標記的鏈霉素加入到到孔中。 再次洗滌板孔，向孔中加入TMB底物溶液，底物顯色與所結合的IL-10量成比例。 加入終止液顏色從藍色變為黃色，并且在450nm處測量顏色的吸光度值。
犬IL-10檢測試劑盒組成成分
| 組分 | 表述 | 儲存/預準備后穩定性 | | IL-10酶標板（項目A） | 12*8=96孔，包被有抗小鼠IL-10抗體 | 4℃ 1個月 | | 濃縮洗滌液（20x）（項目B） | 20x濃縮溶液 25ml | 4℃ 1個月 | | 標準蛋白（項目C） | 2瓶小鼠IL-10。1個小瓶就夠配制每個一式兩份的標準品。 | -80℃1周 | | 檢測抗體IL-10（項目F） | 2瓶生物素化的抗小鼠IL-10。
每個小瓶足以測定微板的一半。 | 4℃ 5天 | | 濃縮HRP-鏈霉親和素（項目G） | 200μl 350X濃縮HRP綴合鏈霉親和素 | 不能保存和重新使用 | | 一步法TMB底物（項目H） | TMB溶液12ml | N/A | | 終止液（項目I） | 8ml 0.2M硫酸 | N/A | | 測定稀釋劑D（項目K） | 15ml 5X濃縮液 | 4℃ 1個月 | | 測定稀釋劑B（項目E） | 15ml 5X濃縮液 | 4℃ 1個月 | | 將未使用的板條重新裝回到含有干燥劑包的袋中，沿著整個邊緣重新密封。 |
犬IL-10檢測試劑盒存儲條件
犬IL-10檢測試劑盒可在-20°C下保存，從裝運之日起存放可長達1年。 避免反復凍融循環。 試劑盒可以在4℃下儲存長達6個月。 對于更長時間儲存時，建議儲存在-80°C。 該試劑盒組分見下表。
犬IL-10檢測試劑盒檢測步驟
1.使用前將所有試劑和樣品置于室溫（18 - 25oC）。建議所有標準和樣品至少重復一次。
2.根據您的實驗標記可拆卸的8孔條。
3.分別加入樣品和每個標準品100μl（參見試劑制備步驟3）到適當的板孔中。蓋上蓋子，室溫溫和振蕩孵育2.5小時
4.棄去溶液，用1X洗滌液洗滌4次。使用多通道移液器或自動洗板機洗板，每孔加入洗滌緩沖液（300μl）。每個步驟中去除液體對于良好的性能是至關重要的。洗完后，通過吸取或傾析清除任何剩余的洗滌緩沖液。倒置板并用干凈的吸水紙吸干印跡。 5.每孔加入100μl1X制備的生物素化抗體（試劑制備步驟6）。在室溫下溫和振蕩孵育1小時。
6.棄去溶液。重復洗滌，如步驟4。
7.加入100μl制備的鏈霉親和素溶液（見試劑制備步驟7）。在室溫下溫和搖動孵育45分鐘。
8. 棄去溶液。 重復洗滌，如步驟4。
9.向每個孔中加入100μlTMB一步底物試劑（項目H）。在室溫下在黑暗中輕輕振蕩孵育30分鐘。
10.向每個孔中加入50μl終止液（項目I）。 立即讀取450 nm處吸光度值。
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