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總三碘甲狀腺原氨酸檢測試劑盒（定量）用于人血清和血漿中總T3的體外定量檢測

【前言簡介】

科潤達生物代理的這款試劑盒是進口試劑盒，用于檢測樣本中的總三碘甲狀腺原氨酸（T3），血清三碘甲狀腺原氨酸濃度的測定通常被認為是診斷甲狀腺功能異常的有價值工具。這一重要性為過去20年發生的分析方法學的重大改進提供了動力。單一特異性抗血清的出現和阻斷劑對T3結合血清蛋白的發現，使得發展簡單的放射免疫分析成為可能。

【檢測原理】

總三碘甲狀腺原氨酸（T3）ELISA試劑盒是基于競爭結合原理的固相酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。

微量滴定板上包被有多克隆山羊抗小鼠抗體。標準品、質控品和患者血清與含有抗T3的單克隆抗體的分析試劑一起孵育。在后續的孵育過程中，患者樣品的內源性T3與T3辣根過氧化物酶綴合物競爭有限數量的固相結合位點。孵育后，將未結合的共軛物洗掉。

結合過氧化物酶結合物的量與樣品中T3的濃度成反比。添加底物溶液后，顯色強度與患者樣品中T3的濃度成反比。

【檢測方法】

試劑準備

洗滌液：洗滌液加入蒸餾水，制成洗滌液，充分混勻。

檢測步驟

總三碘甲狀腺原氨酸檢測試劑盒（定量）檢測前，所有試劑和樣本需在室溫平衡30min，試劑混勻并避免起泡。一旦實驗開始，所有步驟不能被打斷。注意更換槍頭，避免污染。孵育步驟嚴格按照時間和溫度進行。

1） 取所需數目的板條。

2） 將標準品、質控品和樣品分別50μl加入到相應的微孔中，注意更換槍頭。

3） 每孔加入50ul分析試劑，混勻10秒鐘，這步驟很重要。

4） 室溫（18-25℃）溫育30分鐘。

5） 在每一微孔中加入50μl酶聯物，輕輕振板混勻10秒鐘，混勻步驟很重要。

6） 室溫（18-25℃）溫育30分鐘。

7） 棄取孔內反應液，每孔用300μl稀釋好的洗滌液洗板5次。最后在吸水紙上拍干除去殘余液體。清洗過程的正確與否對測定結果的靈敏度和精密度有很大影響。

8） 在每一微孔中加入100μl TMB底物液。

9） 室溫（18-25℃）溫育10分鐘。

10） 在每一微孔中加入100μl 終止液以終止底物反應。

11） 加終止液后10分鐘內450nm處讀取OD值。

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