TNF-α檢測試劑盒采用重組 Protein G包埋的96孔酶標板以錨定多克隆抗體分子，試劑盒內提供的HRP偶聯物直接與待測樣本內競爭性的結合到酶標板的抗體上。孵育并清洗后，結合到酶標板上的HRP偶聯物數量可以很方便的通過HRP顯色底物等試劑在OD450nm處讀取。這樣OD450 nm的數值與樣本內的含量呈負相關。
TNF-α檢測試劑盒影響標準曲線的主要因素有哪些？
1）不*的洗滌會降低測定性，導致不理想的標準曲線結果。務必確保洗板機的正常工作，確保酶標板各孔被充分洗滌卻不干燥。
2）不合理的移液操作會導致高CV值和不理想曲線。
3）在制作標準曲線的過程中，TNF-α檢測試劑盒不正確的移液方式會導致錯誤的稀釋，從而使錯誤的數值進入標準曲線中，或者產生非線性曲線。確保移液器正常工作。每個孔中的液體體積不等可能就是移液器失靈或者槍頭使用不當所致。
4）TNF-α檢測試劑盒在測定不同板中的樣品時，每一個板都對應一條標準曲線。技術錯誤或者不同的孵育情況，環境條件都會引起酶標板之間產生不同結果。一條標準曲線測定的樣品值必需是在相同環境下產生的，否則就是無效值。
