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細胞因子檢測和分子生物學測定法有什么不同?
    細胞因子檢測是由免疫細胞(如單核、巨噬細胞、T細胞、B細胞、NK細胞等)和某些非免疫細胞(內皮細胞、表皮細胞、纖維母細胞等)經刺激而合成(一般是免疫細胞)、分泌的一類生物活性物質分泌的蛋白質,在體內廣泛參與免疫調節(jié)及炎癥反應、組織修復、刺激造血系統、刺激細胞的增殖與凋亡等重要生理活動,在抵抗外來病原及維持機體內環(huán)境平衡中均起重要作用。
 
   細胞因子檢測均為蛋白或多肽,具有較強的抗原性。隨著重組細胞因子的出現,可較方便地獲得細胞因子的特異性抗血清或單克隆抗體,因此可利用抗原抗體特異性反應的特性,用免疫學技術定量檢測細胞因子。
 
    生物學測定法的原理是根據細胞因子對特定的依賴性細胞株(即靶細胞)的促增殖作用,以增殖細胞中的DNA的合成或酶活性為指標,間接推算出細胞因子的活性單位,如對IL-1、IL-2等細胞因子活性的檢測。亦可根據某些細胞因子對特定靶細胞的殺傷效應或對病毒的抑制作用進行測定,如對腫瘤壞死因子及干擾素的生物活性測定。
 
    分子生物學測定法是目前采用的技術有各種印跡法、斑點雜交、原位雜交和PCR等。通過檢測細胞內細胞因子的基因組成或mRNA量,推算出細胞因子的合成量。
 
    在實際應用中,可根據各自的實驗目的和實驗室條件進行選擇。生物學檢測法比較敏感,又可直接測定生物學功能,是zui可靠的方法,適用于各種實驗目的,是科研部門zui常用的技術,但需要長期培養(yǎng)依賴性細胞株,檢測耗時長,步驟繁雜,影響因素多,不容易熟練掌握。
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